CONTROL ALIMENTARIO

Espectro de absorción de la hemoglobina‏

Material:
-3 tubos de ensayo
-Gradilla para los tubos
-Pipeta y prepipeta
-Micropipeta de 20 microlitros
-Espectofotometro
-Cubetas de plástico
-Gradillas para las cubetas
-Pipeta Pasteur
-Férricianuro (drabking)
-20 microlitros de hemoglobina al 15g/dl
-20 microlitros de sangre

Preparación de disoluciones:
1~> Reactivo o blanca (Férricianuro): pipeteamos 5 ml y los llevamos a un tubo de ensayo
2~> Calibrador o sustancia patrón: pipeteamos 5 ml de Férricianuro y 20 microlitros de hemoglobina, que lo echaremos en un tubo de ensayo.
3~> Muestra: pipeteamos 5 ml de ferricianuro y lo llevamos a un tubo de ensayo; con una micropipeta cogemos 20 microlitros de sangre que acabamos de extraer y lo llevamos también al tubo de ensayo.

Procedimiento:
Cogemos dos cubetas, las cuales llenáremos 2/3 de su capacidad. Una la llenaremos con drabking (muestra blanca), y la otra con la muestra patrón.
La longitud de onda es visible entre 390-700 (Oriente debajo de 390 infrarrojos, y por encima del 700 ultravioleta). Vamos a toma luna medición de 20 en 20 desde 440 hasta 600.
Al inicio de la práctica hemos encendido el espectofotometro, que lo ponemos con una longitud de onda de 440 nm. Metemos la cubeta con drabfking y pulsamos "zero", la sacamos y metemos la cubeta patrón obteniendo una absorbancia. Una vez obtenido el dato, cambiamos la longitud de onda a 460 y metemos la sustancia blanca, damos a "zero", y metemos la sustancia patrón, obteniendo una absorbancia. Este procedimiento lo repetimos hasta 600 nm, obteniendo los siguientes datos:

Con estos datos hacemos una gráfica: